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LB培养基

2025-12-11 04:21:14

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2025-12-11 04:21:14

LB培养基】LB培养基(Luria-Bertani Medium)是一种广泛应用于分子生物学和微生物学领域的基础培养基,主要用于大肠杆菌(E. coli)等原核生物的培养。其配方简单、成本低廉且效果稳定,是实验室中常用的细菌培养基之一。

一、LB培养基简介

LB培养基由三部分组成:酵母提取物、胰蛋白胨和氯化钠。这些成分提供了细菌生长所需的氮源、碳源、矿物质和其他营养物质。该培养基在液体或固体形式下均可使用,适用于菌株的扩增、转化实验及质粒提取等操作。

LB培养基具有良好的可重复性和稳定性,适合多种细菌的生长,尤其在基因工程领域中应用广泛。此外,它还可以通过添加抗生素、指示剂或其他添加剂来满足特定实验需求。

二、LB培养基成分与作用

成分 含量(g/L) 作用
酵母提取物 5 g 提供氮源、维生素和氨基酸
胰蛋白胨 10 g 提供有机氮源和生长因子
氯化钠(NaCl) 5 g 维持渗透压,促进细胞生长
琼脂(用于固体培养基) 15–20 g 凝固培养基,形成固体表面

三、LB培养基制备方法

1. 称量:根据需要准备适量的培养基成分。

2. 溶解:将各成分加入蒸馏水中,搅拌至完全溶解。

3. 灭菌:采用高压蒸汽灭菌法(121℃,15–20分钟)。

4. 分装与保存:灭菌后冷却至适宜温度,分装于三角瓶或平皿中,避免污染。

四、LB培养基的应用

- 菌株扩增:用于大肠杆菌等细菌的快速繁殖。

- 转化实验:作为感受态细胞的培养基。

- 质粒提取:在提取质粒前进行菌液培养。

- 筛选实验:结合抗生素筛选标记进行阳性克隆筛选。

五、注意事项

- 制备过程中应保持无菌操作,防止杂菌污染。

- 使用前应检查培养基是否变质或结块。

- 不同实验对培养基浓度可能有不同要求,需根据实际调整。

总结:LB培养基因其成分简单、效果稳定、成本低而成为微生物实验中的常用工具。无论是基础研究还是应用开发,LB培养基都发挥着重要作用。合理制备和使用该培养基,有助于提高实验效率和结果准确性。

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